毒理學(xué)研究是藥物非臨床安全性評價過程中重要環(huán)節(jié)，目的在于在研新藥用于人體之前以及在臨床研究進(jìn)行過程中，闡明靶器官的**反應(yīng)、劑量相關(guān)性、**與藥物暴露的關(guān)系以及**反應(yīng)的可逆性。這些信息有助于估算首次用于人體試驗(yàn)的安全起始劑量和劑量范圍、選擇監(jiān)測臨床不良反應(yīng)的指標(biāo)，為確保臨床受試者的安全提供重要的科學(xué)依據(jù)。毒理數(shù)據(jù)是介于臨床前和臨床之間的橋梁，全面理解毒理數(shù)據(jù)對臨床試驗(yàn)設(shè)計具有重要意義。

       臨床前需要做的常規(guī)毒理試驗(yàn)如下：

       對于急性**試驗(yàn)，F(xiàn)DA不要求做，因?yàn)檫@么多動物提供的數(shù)據(jù)參考價值不大。但目前CFDA是要求做的,如果缺了該條可能不受理。安全藥理試驗(yàn)，如果該藥發(fā)現(xiàn)心臟**問題，可能需要對心臟**機(jī)制補(bǔ)充研究，如果該藥有主要靶標(biāo)和次要靶標(biāo)，次要靶標(biāo)活性很強(qiáng)，這時需要進(jìn)行次要藥效學(xué)或補(bǔ)充的安全藥理研究。對于注射劑需要做過敏試驗(yàn)（包括主動全身過敏，被動皮膚過敏試驗(yàn)）和溶血性試驗(yàn)（體內(nèi)、體外溶血）。

       關(guān)于遺傳毒理試驗(yàn)，抗腫瘤藥物可以在IND之后臨床II期開展是沒有問題的。對于生物藥指導(dǎo)原則不要求進(jìn)行遺傳**試驗(yàn)，原因是大部分生物藥作用于細(xì)胞表面，而不進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，所以生物藥產(chǎn)生遺傳**的可能性較?。ㄈ绻蠓肿铀幬镒饔冒悬c(diǎn)和生長因子相關(guān)，可能要做）。

       生殖毒理試驗(yàn)，現(xiàn)在作為ICH成員國，IND前可以不做生殖毒理，但需要符合以下要求：申請臨床試驗(yàn)的試驗(yàn)例數(shù)不超過150例，且長毒試驗(yàn)中生殖器官沒有出現(xiàn)**。

       重復(fù)給藥**試驗(yàn)是藥物非臨床安全性研究的重要組成部分，是綜合性最強(qiáng)、獲得信息最多、對臨床指導(dǎo)意義的一項毒理學(xué)試驗(yàn)，其試驗(yàn)結(jié)果可判斷受試物的**靶器官，預(yù)測受試物可能引起的臨床不良反應(yīng)，確定未觀察到**反應(yīng)劑量水平（NOAEL），從而根據(jù)NOAEL推算推測第一次臨床試驗(yàn)（FIH)的起始劑量。

       從NOAEL換算成人等效劑量（HED）公式如下：HED=Animal dose*Animal Km/Human Km,

       舉個列子：比如比格犬重復(fù)給藥**試驗(yàn)，NOAEL為5 mg/kg，HED=5 mg/kg*20/37=2.7mg/kg。選擇人安全系數(shù)（1/10到1/1000之間），如果以1/10作為起始劑量計算的安全系數(shù)，1/10*2.7mg/kg*50kg=13.5mg，13.5mg可為第一次人體實(shí)驗(yàn)（FIH）起始劑量的參考。此外還有以生物暴露量為基礎(chǔ)，接近藥理作用機(jī)制的推導(dǎo)方式，研究者最終采用的起始劑量應(yīng)是各種推算方法中得到的較低劑量。

       同時，動物毒理試驗(yàn)要和臨床周期相匹配：

       有些情況，如抗腫瘤藥，I期臨床可能受益的病人從倫理角度不能停藥，一個月長毒試驗(yàn)可能無法支持長期臨床試驗(yàn)。很多國內(nèi)臨床醫(yī)院在過倫理時候因?yàn)檫@個問題通不過，而國外鮮有。這情況下，可以先報IND,藥監(jiān)局不會因?yàn)樗闹艿亩纠碓囼?yàn)不讓上臨床。在不清楚人體代謝的情況下，IND前做很長的毒理試驗(yàn)沒有太大意義。在臨床I期病人人體藥代數(shù)據(jù)出來后，評估該數(shù)據(jù)，未來在人身上的代謝有助于該藥往前推進(jìn)，就盡快啟動3個月的毒理試驗(yàn)，從而保證臨床可能獲益的病人繼續(xù)用藥的時候，用于支持的毒理試驗(yàn)已經(jīng)做完。在IND階段毒理試驗(yàn)做的時間越長，NOAEL就越低，臨床爬坡起始劑量就越低，會造成比較大的臨床損失。

       試驗(yàn)動物的選擇需要注意的是：不同的靶器官動物的敏感性不一樣，比如比格犬的胃腸道敏感，如果該藥物有胃腸道**的話，狗是合適種屬。如果是作用于凝血系統(tǒng)的藥物，凝血系統(tǒng)狗和人是最接近的。尤其是對于大分子藥物，一定要選擇相關(guān)種屬進(jìn)行試驗(yàn)，如果選擇不相關(guān)種屬可能對試驗(yàn)數(shù)據(jù)造成誤解。

       對于**試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析時，應(yīng)正確理解均值數(shù)據(jù)和個體數(shù)據(jù)的意義。在分析重復(fù)給藥**試驗(yàn)結(jié)果時應(yīng)綜合考慮數(shù)據(jù)的統(tǒng)計學(xué)意義和生物學(xué)意義，要考慮具有統(tǒng)計學(xué)意義并不一定代表具有生物學(xué)意義；在判斷生物學(xué)意義時要考慮參數(shù)變化的劑量-反應(yīng)關(guān)系、其他關(guān)聯(lián)參數(shù)的改變、與歷史背景數(shù)據(jù)的比較等因素。在分析毒理數(shù)據(jù)時一定要注意生理波動，血壓、心律、內(nèi)分泌等都存在生理波動。還有一點(diǎn)是不要輕易用動物個體差異解釋異常數(shù)據(jù)，哪怕1/100只動物出現(xiàn)個體差異且呈量效關(guān)系，也不能排除是藥物引起。

       將長期**研究結(jié)果外推指人體時需要注意：不同種屬或個體之間對于受試物的**反應(yīng)存在差異。比如：1）嚙齒類動物沒有膽囊，膽汁淤積性肝損傷或膽管增粗時，易出現(xiàn)胰 腺損傷，而人狗猴絕對不會出現(xiàn)，這是和生理結(jié)構(gòu)相關(guān)。所以不要因?yàn)樵诶鲜笊砩峡吹揭淮蠖岩?腺疾病眼睛就睜大，可以在臨床上設(shè)計胰 腺不良反應(yīng)指標(biāo)。2）嚙齒類動物牙齒不斷增長，作用于EGFR靶點(diǎn)的抑制劑，會導(dǎo)致老鼠斷牙，不能推到人。3）狗是特別容易產(chǎn)生過敏或類過敏反應(yīng)，如對吐溫80超敏，極易出現(xiàn)肥大細(xì)胞脫顆粒。如果制劑中含吐溫80，不適合選狗做毒理試驗(yàn)。4）藥物作用靶點(diǎn)在不同種屬和人體分布不同。比如PCSK9靶點(diǎn),長毒NOAEL劑量用在生殖毒試驗(yàn)中是致死劑量，死亡的原因是肝 臟**。通過查文獻(xiàn)和追加試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)PCSK9靶點(diǎn)在懷孕嚙齒類動物中肝 臟是高表達(dá)的。5）有些靶點(diǎn)人和動物的敏感性不一樣。像現(xiàn)在做的比較多的分子靶向藥，特別是抗腫瘤藥物，他們的共同特點(diǎn)是：和人相比的話，動物的耐受性不好，敏感性很差，人是相反的。所以往往這一類藥物安全窗臨床前和臨床不一樣，比如阿帕替尼。6）免疫原性，中國目前更偏向于臨床前免疫原性研究，臨床前動物免疫原性結(jié)果對于推到人，參考價值并不大。國外很多大企業(yè)臨床前免疫原性是不做的，我們中國做的意義是用它來解釋毒理數(shù)據(jù)。7）毒理研究中給藥劑量較高，供試品在動物體內(nèi)可能呈非線性動力學(xué)代謝過程，從而導(dǎo)致與人體無關(guān)的**。8）人與動物代謝產(chǎn)物不同導(dǎo)致的**反應(yīng)。比如代謝產(chǎn)物導(dǎo)致的**，藥物在人體能檢測出代謝產(chǎn)物，而在動物中均檢測不出來，就無法為臨床提供數(shù)據(jù)支持。

       一個好的臨床設(shè)計人員，根據(jù)毒理上所出現(xiàn)的反應(yīng)、所提示的靶器官，應(yīng)該對這些有所把握，但一個原則，在臨床設(shè)計的時候必須首先假設(shè)人最為敏感，長期**研究中動物的**反應(yīng)有可能在臨床試驗(yàn)中再現(xiàn)。本著這樣的原則去設(shè)計實(shí)驗(yàn)，才能限度的保證人體實(shí)驗(yàn)安全。

       對于治療一般性疾病的藥物，臨床用藥人群廣的，安全窗非常重要。一定要分析毒理NOAEL,盡可能發(fā)現(xiàn)死亡劑量，了解死亡原因；對于"無毒"的藥首先要考慮是否在體內(nèi)暴露；特別要重視以導(dǎo)致猝死的靶器官**：心臟、中樞神經(jīng)、過敏休克等；要考慮臨床病人在病理狀態(tài)下對靶器官**的放大，前期為遺傳**陽性的藥要慎重；對離子通道有影響的藥要慎重。

       總之，毒理學(xué)研究為臨床提供首劑劑量和耐受劑量設(shè)計的依據(jù)，為臨床不良反應(yīng)提供觀察指標(biāo)，為臨床設(shè)計充分考慮種屬差異、關(guān)注重要靶器官**提供支持。要假定人是對**反應(yīng)最敏感的前提下設(shè)計方案，限度的保障人體實(shí)驗(yàn)安全。

       作者簡介：磐盛，目前在國內(nèi)一家上市公司從事臨床前項目管理工作，工總主要負(fù)責(zé)藥效、藥代、毒理、IND申報，通過公司資源打造新藥研究及申報整合服務(wù)平臺，為客戶提供一體化新藥研究及全球申報解決方案。